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        產(chǎn)品名稱:

        PC-9/GR人肺腺癌細(xì)胞吉非替尼耐藥株

        產(chǎn)品型號: 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-29
        PC-9/GR人肺腺癌細(xì)胞吉非替尼耐藥株
        該細(xì)胞公司*,培養(yǎng)狀態(tài)下的,現(xiàn)貨一周供應(yīng),我公司可100%保障該細(xì)胞的質(zhì)量,代數(shù)年輕活性好,不含有細(xì)菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體 。

        產(chǎn)品概述

        PC-9/GR人肺腺癌細(xì)胞吉非替尼耐藥株

        生長特性:貼壁生長

        數(shù)量:1000
        規(guī)格:1管

        微生物及支原體檢測:陰性

        安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。

        (一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

        ()如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

        1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

        2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

        3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。

                   注意事項(xiàng):

        1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?/span>10X20X物鏡下。

        2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

        3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

        4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時(shí)與我們。

        PC-9/GR人肺腺癌細(xì)胞吉非替尼耐藥株

        貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
        1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進(jìn)行消化處理
        2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
        3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

        貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作
        1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間)
        2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
        3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
        4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存

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