亚洲成色www成人网站妖精,涩涩视频国人精品成人永久,免费a V网站,天天摸日日摸

        歡迎訪問杭州仟諾生物科技有限公司網(wǎng)站!
        銷售咨詢熱線:
        17758005454
        您的位置: 網(wǎng)站首頁 >> 產(chǎn)品中心 >> 細胞株 >> 人源細胞系 > HL-1小鼠心肌細胞
        產(chǎn)品名稱:

        HL-1小鼠心肌細胞

        產(chǎn)品型號: 產(chǎn)品時間: 2024-07-28
        HL-1小鼠心肌細胞
        該細胞公司*,培養(yǎng)狀態(tài)下的,現(xiàn)貨一周供應,我公司可100%保障該細胞的質量,代數(shù)年輕活性好,不含有細菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體 。

        產(chǎn)品概述

        HL-1小鼠心肌細胞

        生長特性:    □ 貼壁   □ 懸浮   □懸浮+貼壁

        細胞生長條件:

        培養(yǎng)條件   

              DMEM(高糖)+10%FBS+1%雙抗

        溫度                   

                     37℃

        空氣條件  

                   5% CO2,95% AIR

        傳代方法

        1:2傳代,2~3天換液

        凍存條件

        90%FBS+10%DMSO

        二.使用方法

        按照以下方法進行操作

        取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。

        2、細胞傳代:

        1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

        2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

        3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37,5%CO2胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

        4)待細胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代

        3、細胞凍存:

        1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

        2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

        3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

        4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

        4、細胞復蘇:
        1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37水浴中解凍,直至凍存管中結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
        2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;

        3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

        4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

        HL-1小鼠心肌細胞
        貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
        1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
        2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
        3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

        貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作
        1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
        2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
        3.取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
        4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存

        留言框

        • 產(chǎn)品:

        • 您的單位:

        • 您的姓名:

        • 聯(lián)系電話:

        • 常用郵箱:

        • 省份:

        • 詳細地址:

        • 補充說明:

        • 驗證碼:

          請輸入計算結果(填寫阿拉伯數(shù)字),如:三加四=7
        分享到:
        版權所有©2018 杭州仟諾生物科技有限公司 備案號:浙ICP備18056619號-1
        • 掃一掃,關注我們